Resumen:
El efecto de las longitudes de onda de excitación o emisión en la polarización generalizada de Laurdan (GP) puede ser evaluado por GPS,
Determinación simplificada de la pendiente del espectro GP, cuya dependencia termotrópica permite evaluar el fosfolípido
Membrana laminar fase, como se muestra en una publicación reciente de nuestro laboratorio [J. Vela'zquez, M.S. Fernández, Arch. Biochem. Biophys.
455 (2006) 163 - 174]. En el presente trabajo, aplicamos Laurdan GPS a los estudios de transición de fases de liposomas mixtos de dos fosfatidilcolina
Preparados a partir de proporciones variables de dimiristoil- y dipalmitoilfosfatidilcolina (DMPC y DPPC, respectivamente). Nosotros
Han descubierto que la función GPS informa un claro límite entre la región de coexistencia de fase gel / cristal líquido y la región de cristal líquido
No sólo a una cierta temperatura Tc para los liposomas de composición constante sometidos a exploraciones de temperatura, sino también a una temperatura
Definida Xc, para liposomas de dos componentes de composición variable a temperatura constante. Los valores de Tc o Xc
Obtenidos de GPS frente a la temperatura o GPS frente a los gráficos de composición, respectivamente, permiten la construcción de un diagrama de fase parcial para
Las mezclas de DMPC-DPPC, que muestran el límite entre la región de coexistencia de dos fases y el estado líquido-cristalino. Igualmente,
En el inicio de la región de transición, es decir, la región de coexistencia de dos fases detectada por GPS, es posible determinar, aunque con
Menos precisión, una temperatura To o una fracción molar Xo que define un límite situado por debajo pero próximo al límite entre el gel y la ondulación
Fase, se informa en la literatura. Estos resultados del GPS son consistentes con la propuesta de varios autores de que una fracción de fosfolípidos de La
Coexiste con fosfolípidos de gel en la fase ondulada.
Descripción:
The effect of the excitation or emission wavelengths on Laurdan generalized polarization (GP) can be evaluated by GPS, a quantitative,
simplified determination of the GP spectrum slope, the thermotropic dependence of which allows the assessment of phospholipid
lamellar membrane phase, as shown in a recent publication of our laboratory [J.B. Vela´zquez, M.S. Ferna´ndez, Arch. Biochem. Biophys.
455 (2006) 163–174]. In the present work, we applied Laurdan GPS to phase transition studies of mixed, two-phosphatidylcholine liposomes
prepared from variable proportions of dimyristoyl- and dipalmitoylphosphatidylcholine (DMPC and DPPC, respectively). We
have found that the GPS function reports a clear limit between the gel/liquid-crystalline phase coexistence region and the liquid-crystalline
state, not only at a certain temperature Tc for liposomes of constant composition submitted to temperature scans, but also at a
defined mole fraction Xc, for two-component liposomes of variable composition at constant temperature. The Tc or the Xc values
obtained from GPS vs. temperature or GPS vs. composition plots, respectively, allow the construction of a partial phase diagram for
the DMPC–DPPC mixtures, showing the boundary between the two-phase coexisting region and the liquid-crystalline state. Likewise,
at the onset of the transition region, i.e., the two-phase coexisting region as detected by GPS, it is possible to determine, although with
less precision, a temperature To or a mole fraction Xo defining a boundary located below but near the limit between the gel and ripple
phase, reported in the literature. These GPS results are consistent with the proposal by several authors that a fraction of La phospholipids
coexists with gel phospholipids in the rippled phase.