Resumen:
Hay un interés creciente en el uso de partículas similares a virus (VLP) como andamios para la presentación de antígenos de elección para el sistema inmunológico. En este trabajo, las VLP de la papaya ringspot proteína de la cápside de virus expresada en Escherichia coli se evaluaron como potenciadores de la respuesta de anticuerpos contra un antígeno soluble. Curiosamente, aunque la proteína de la cápside carece de una etiqueta de histidina, se logró su purificación por cromatografía de afinidad de metal inmovilizado. La formación de las VLP se demostró mediante microscopía electrónica por primera vez para esta proteína de la cápside. VLP se enriquecieron por precipitación con polietilenglicol. Además, estas VLP se acoplaron químicamente a la proteína verde fluorescente con el fin de evaluarlos como portadores de antígenos; sin embargo, se observó inestabilidad bioconjugado. No obstante, se evaluó el efecto adyuvante de estos VLP en ratones BALB / c, utilizando GFP como antígeno, lo que resulta en un aumento significativo de anti-GFP respuesta de IgG, en particular, la clase IgG1, lo que demuestra que las VLP mejorar la respuesta inmune contra el antígeno elegido en este estudio.
Descripción:
There is a growing interest in using virus-like particles (VLPs) as scaffolds for the presentation of antigens of choice to the immune system. In this work, VLPs from papaya ringspot virus capsid protein expressed in Escherichia coli were evaluated as enhancers of antibody response against a soluble antigen. Interestingly, although the capsid protein lacks a histidine tag, its purification by immobilized metal affinity chromatography was achieved. The formation of VLPs was demonstrated by electron microscopy for the first time for this capsid protein. VLPs were enriched by polyethylene glycol precipitation. Additionally, these VLPs were chemically coupled to green fluorescent protein in order to evaluate them as antigen carriers; however, bioconjugate instability was observed. Nonetheless, the adjuvant effect of these VLPs on BALB/c mice was evaluated, using GFP as antigen, resulting in a significant increase in anti-GFP IgG response, particularly, IgG1 class, demonstrating that the VLPs enhance the immune response against the antigen chosen in this study.