Transcriptional regulation of human paraoxonase 1 by PXR and GR in human hepatoma cells

Abstract

La paraoxonasa 1 humana (PON1) es A-esterasa sintetizada en el hígado y secretada al plasma, donde se asocia con HDL. PON1 actúa como un antioxidante que previene la oxidación de lípidos y desintoxica una amplia gama de sustratos, incluyendo compuestos organofosforados. La variabilidad de PON1 (actividad enzimática / niveles séricos) se ha atribuido a factores internos y externos. Sin embargo, los mecanismos moleculares implicados en la regulación transcripcional de PON1 no han sido bien estudiados. El objetivo de este estudio fue evaluar y caracterizar la activación transcripcional de PON1 por receptores nucleares (NR) en células de hepatoma humano. Se realizó análisis in silico en la región promotora de PON1 para determinar los elementos de respuesta de NR. Se utilizó PCR en tiempo real para evaluar el efecto de ligandos NR específicos sobre los niveles de ARNm de genes regulados por NR y PON1. Los resultados indicaron que los elementos de respuesta NR tenían una homología del 95% con la pregnenolona (PXR), glucocorticoides (GR), ácido retinoico (RXR) y receptor alfa activado por proliferador de los peroxisomas (PPARα). Los tratamientos con Dexametasona (ligando GR), Rifampicina (ligando PXR) y TCDD (ligando AhR) aumentaron los niveles de ARNm de PON1 a las 24 y 48 h. Hemos demostrado que la activación de GR por Dexametasona resultados en la inducción de genes PON1 acompañado de un aumento en los niveles de actividad. En conclusión, estos resultados demuestran que GR regula la transcripción del gen PON1 a través de la unión directa a los elementos de respuesta NR a - 95 a - 628 pb del promotor PON1. Este estudio sugiere nuevos mecanismos moleculares para la regulación transcripcional de PON1 a través de un proceso que implica la activación de PXR.