Resumen:
La diversidad de celulasas y xilanasas secretadas por Cellulomonas flavigena cultivadas en bagazo de caña de azúcar, Solka-floc, xilano o glucosa se exploró por electroforesis en gel bidimensional. C. flavigena produjo la mayor variedad de celulasas y xilanasas en el bagazo de caña de azúcar. Se expresaron múltiples proteínas extracelulares con estos sustratos de crecimiento, y un conjunto limitado de ellos coincidió en todos los sustratos. Trece proteínas con carboximetil celulasa o actividad xilanasa fueron cromatografía líquida / espectrometría de masas secuenciada. Las proteínas SP4 y SP18 se identificaron como productos de genes celA y celB, respectivamente, mientras que SP20 y SP33 eran isoformas de la celulasa bifuncional / xilanasa Cxo recientemente secuenciada y caracterizada en C. flavigena. El resto de las proteínas detectadas eran enzimas desconocidas con actividad de carboximetil celulasa o xilanasa. Todas las proteínas alineadas con glicosil hidrolasas enumeradas en la base de datos del Centro Nacional de Información Biotecnológica, principalmente con enzimas celulasa y xilanasa. Una de estas enzimas desconocidas, la proteína SP6, fue inducida de forma cruzada por el bagazo de caña de azúcar, Solka-floc y xilano. Las diferencias en los mapas de expresión de los cultivos actualmente inducidos revelaron que C. flavigena produce y secreta múltiples enzimas para usar una amplia gama de sustratos lignocelulósicos como fuentes de carbono. La expresión de estas proteínas depende de la naturaleza del sustrato celulósico.
Descripción:
The diversity of cellulases and xylanases secreted by Cellulomonas flavigena cultured on sugar cane bagasse, Solka-floc, xylan, or glucose was explored by two-dimensional gel electrophoresis. C. flavigena produced the largest variety of cellulases and xylanases on sugar cane bagasse. Multiple extracellular proteins were expressed with these growth substrates, and a limited set of them coincided in all substrates. Thirteen proteins with carboxymethyl cellulase or xylanase activity were liquid chromatography/mass spectrometry sequenced. Proteins SP4 and SP18 were identified as products of celA and celB genes, respectively, while SP20 and SP33 were isoforms of the bifunctional cellulase/xylanase Cxo recently sequenced and characterized in C. flavigena. The rest of the detected proteins were unknown enzymes with either carboxymethyl cellulase or xylanase activities. All proteins aligned with glycosyl hydrolases listed in National Center for Biotechnology Information database, mainly with cellulase and xylanase enzymes. One of these unknown enzymes, protein SP6, was cross-induced by sugar cane bagasse, Solka-floc, and xylan. The differences in the expression maps of the presently induced cultures revealed that C. flavigena produces and secretes multiple enzymes to use a wide range of lignocellulosic substrates as carbon sources. The expression of these proteins depends on the nature of the cellulosic substrate.
Repositorio Institucional Aramara
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