A RAPID MULTIPLEX PCR METHOD FOR THE DIAGNOSE OF FREEMARTIN SYNDROME IN DOMESTIC CATTLE (BOS TAURUS)

Abstract

La mayoría de las becerras nacidas como gemelos hetero-sexuales son freemartins estériles. Es importante que esta condición sea diagnosticada a una edad temprana porque las novillas de freemartin no pueden ser utilizado como stock de reposición. Existen diferentes métodos para el diagnóstico del freemartinismo, sin embargo, se prefieren los métodos moleculares debido a su precisión y a la menor duración de los mismos procesos. En el presente estudio, el estado de freemartinismo de 40 terneras de heterosexuales los nacimientos múltiples se investigaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa multiplexada (PCR multiplex). La reacción se llevó a cabo utilizando dos juegos de cebadores para los genes Sry y K-caseína de ganado doméstico. El producto de PCR fue analizado por electroforesis en gel de agarosa (3%), la cual permitido identificar los genotipos de los animales estudiados: machos normales (453 pb y 163 pb), mujeres normales (453 pb), y 39 (97,50%) casos de estudio que mostraron cromosoma cimerismo (freemartin, 453 pb y 163 pb). En comparación con la restricción de la reacción en cadena de la polimerasa técnica de polimorfismo de longitud de fragmento (PCR-RFLP), este método (es decir, PCR múltiplex) resultó ser una forma mucho más barata y rápida (aproximadamente 27 minutos) de diagnosticar el freemartinismo.