Resumen:
Se probaron cinco protocolos de aislamiento de ADN genomico: Clarke et al., (1989), Istvan Nagy et al., (1998), Dellaporta et al., (1983), Saghai- Maroof et al., (1984)y el método de Clarke et al., (1989)modificado por Guillen et al., (2003). Todos los protocolos indicados se han utilizado con éxito en diferentes especies vegetales a excepción del de Clarke et al., (1989) modificado. En todos los procedimientos de aislamiento de ADN, se estandarizó la cantidad de tejido foliar utilizado.Con excepción del método propuesto por Saghai-Maroof et al., (1984)el tejido foliar fue colectado el día previo a su procesamiento y se almacenó a una temperatura de -20 °C. Los iniciadores microsatelites del tipo ISSRs (intersecuencias simples repetidas) empleados fueron siete para obtener un amplio numero de fragmentos de ADN amplificado por secuencias aleatorias de 77 colectas (231 individuos), de aguacate (Persea americana Mill.) raza mexicana existentes en el Banco de Germoplasma de INIFAP- CEFAP-Uruapan, Michoacan. El protocolo descrito por Clarke et al., (1969), modificado por Guillen et al., (2003), resulto ser un método viable para ser utilizado en aguacate. Los marcadores genéticos ISSRs fueron capaces de detectar altos porcentajes de polimorfismo desde un 82.28 a 95.39 %. Se formaron dos grandes grupos, el primero con 11 subgrupos y el segundo con tres subgrupos. Se encontraron materiales con un numero similar de bandas polimorficas, en el subgrupo la provenientes de las colectas 237 de Atlixco, Puebla y CXTC01 de Uruapan, Michoacan, las más disimiles fueron las colectas 532 de Atlixco, Puebla y 309 de Chilchota, Michoacan, pertenecientes al segundo grupo. Existieron algunas variaciones en el agrupamiento de los materiales de Persea americana Mill, La amplia diversidad de las colectas en el banco de germoplasma del CEFAP-Uruapan indico que no existieron materiales duplicados por lo que deben mantenerse para posteriores trabajos de mejoramiento genético.
Descripción:
Five genomic DNA isolation protocols were tested: Clarke et al., (1989), Istvan Nagy et al., (1998), Dellaporta et al., (1983), Saghai-Maroof et al., (1984) and the method of Clarke et al., (1989) modified by Guillen et al., (2003). All the indicated protocols have been used successfully in different plant species with the exception of Clarke et al., (1989) modified. In all DNA isolation procedures, the amount of foliar tissue used was standardized. With the exception of the method proposed by Saghai-Maroof et al., (1984) foliar tissue was collected the day before processing and stored at a time. temperature of -20 ° C. The initiators microsatellites of the type ISSRs (repeated simple intersections) used were seven to obtain a large number of fragments of DNA amplified by random sequences of 77 collections (231 individuals), of avocado (Persea americana Mill.) Existing Mexican race in the Bank of Germplasm of INIFAP- CEFAP-Uruapan, Michoacan. The protocol described by Clarke et al., (1969), modified by Guillen et al., (2003), turned out to be a viable method to be used in avocado. The genetic markers ISSRs were able to detect high percentages of polymorphism from 82.28 to 95.39%. Two large groups were formed, the first with 11 subgroups and the second with three subgroups. Materials with a similar number of polymorphic bands were found, in the subgroup the from collections 237 of Atlixco, Puebla and CXTC01 of Uruapan, Michoacan, the most dissimilar were the collections 532 of Atlixco, Puebla and 309 of Chilchota, Michoacan, belonging to the second group. There were some variations in the grouping of materials from Persea americana Mill. The wide diversity of collections in the germplasm bank of CEFAP-Uruapan indicated that there were no duplicate materials and therefore genetic improvement works should be maintained for later.
Repositorio Institucional Aramara
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